胎牛血清(FetalBovineSerum,簡稱FBS)是一種常用于細胞培養(yǎng)的血清,胎牛血清富含多種生物活性成分,包括生長因子、激素、營養(yǎng)物質(zhì)等。這些成分對于細胞生長、分化和代謝具有重要作用。在細胞培養(yǎng)中,胎牛血清通常被用作培養(yǎng)基的添加劑,以提供細胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。...
1、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2、血清中包含絮狀...
轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰毎麅?nèi)的一種專門技術。分為物理介導方法:電穿孔法、顯微注射和基因槍;化學介導方法:如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導的技術;生物介導方法:有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導的轉(zhuǎn)染技術。理想細胞轉(zhuǎn)染方法,應該具有轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導的轉(zhuǎn)染技術,是目前轉(zhuǎn)染效率較高的方法,同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是病毒轉(zhuǎn)染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。其它物理和化...
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細胞內(nèi)水分透...
原代細胞(primaryculturecell)是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,如蛋白質(zhì)組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。細胞轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰毎麅?nèi)的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)...
轉(zhuǎn)染是采用除病毒感染外的其他方法將核酸(DNA或RNA)人工導入細胞的過程。采用各種化學、生物學或物理方法導入外源性核酸會改變細胞的特性,從而實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究。轉(zhuǎn)染后,導入的核酸可以瞬時性地存在于細胞內(nèi),只表達一段時間且不會復制,也可以穩(wěn)定地整合至受體基因組內(nèi),隨著宿主基因組的復制而復制,各種基因輸送系統(tǒng)采用的術語與該領域的技術進展步調(diào)一致,并進一步區(qū)分不同的方法和細胞類型。轉(zhuǎn)染技術作為一種分析工具,可將外源基因?qū)胝婧思毎?,有助于機體表征遺傳、蛋白質(zhì)合成、細...
細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。影響細胞轉(zhuǎn)染效率的因素有哪些?1.轉(zhuǎn)染試劑的選擇不同細胞系轉(zhuǎn)染效率通常不同,但細胞系的選擇通常是根據(jù)實驗的需要,因此在轉(zhuǎn)染實驗前應根據(jù)實驗要求和細胞特性選擇適合的轉(zhuǎn)染試劑。每種轉(zhuǎn)染試劑都會提供一些已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染的細胞株列表和文獻,通過這些資料可選...
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