胎牛血清(FetalBovineSerum,簡(jiǎn)稱FBS)是一種常用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清,胎牛血清富含多種生物活性成分,包括生長(zhǎng)因子、激素、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。這些成分對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和代謝具有重要作用。在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清通常被用作培養(yǎng)基的添加劑,以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。...
細(xì)胞凋亡與壞死是兩種*不同的細(xì)胞凋亡形式,根據(jù)死亡細(xì)胞在形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)上的差別,可以將二者區(qū)別開(kāi)來(lái)。細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法有很多,下面介紹幾種常用的測(cè)定方法。根據(jù)凋亡細(xì)胞固有的形態(tài)特征,人們已經(jīng)設(shè)計(jì)了許多不同的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法。1、光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡(1)未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞的體積變小、變形,細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,細(xì)胞凋亡晚期可見(jiàn)凋亡小體。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。(2)染色細(xì)胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化,核膜裂解、...
外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。1983年,外泌體于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載...
蛋白酶K廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),藥理學(xué)等科研方面.一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲(chǔ)存在-20°C,避光防潮密閉干燥。蛋白酶K主要應(yīng)用于基因檢測(cè)中基因抽取,是檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)的重要原料,蛋白酶K產(chǎn)品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質(zhì)的能力,因而被廣泛應(yīng)用于制備脈沖電泳的染色體DNA,以及去除DNA和RNA中的核酸酶?,F(xiàn)有基因抽提及檢測(cè)試劑盒中均需配備該酶。蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn):20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)(proteinaseK):將2...
CellCountingKit-8(簡(jiǎn)稱CCK8)試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。相信做細(xì)胞的同學(xué)對(duì)他都很熟悉,你確定你使用CCK-8試劑的方式是*正確的嗎?使用CCK-8要注意的事項(xiàng)有哪些:1.酚紅和血清對(duì)CCK8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾,可以通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消去。2.CCK8可以檢測(cè)大腸桿菌,但不能檢測(cè)酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每次測(cè)定的過(guò)程中需要避免細(xì)菌污染,以免影響結(jié)果。3.當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)板最外一圈的孔最容易干燥揮發(fā),由于體積不準(zhǔn)確而增加誤...
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺采取胎牛血獲取的血清,因其未與外界環(huán)境接觸,所以血清內(nèi)IgG等免疫因子相對(duì)含量較少,適合用于免疫類細(xì)胞的培養(yǎng)。胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異還是很明顯的。首先,胎牛血清總蛋白含量(g/dl)約為2%-4%,新生牛血清約為3.0%-5.0%,成牛血清則高達(dá)8%-10%.從蛋白含量上也可以初步判斷一個(gè)血清是否為胎?;蛐律Q?,蛋白含量越高說(shuō)明牛齡越大,目前檢測(cè)蛋白含量是初步檢測(cè)一項(xiàng)重...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門(mén)技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)幾天,多用于啟動(dòng)子和其它調(diào)控元件的分析。一般來(lái)說(shuō),超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高,在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)(依賴于各種不同的構(gòu)建)分析結(jié)果,常常用到一些報(bào)告系統(tǒng)如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來(lái)幫...
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