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影響核酸電泳遷移率的幾個因素1、核酸分子大小在一定濃度的瓊脂糖凝膠中，DNA片段遷移距離和其含有的堿基對數(shù)量成反比，因此可以通過與標準條帶遷移距離進行比較，由此得出目的條帶的大小，但這僅對雙鏈線性的DNA比較準確(DNAMarker一般為雙鏈線狀DNA)，且對大于20kb的DNA不適用(普通瓊脂糖凝膠很難將其分開)。2、核酸分子構(gòu)象DNA分子在電場中的遷移速度不僅和分子量有關(guān)，還和它本身的構(gòu)象有關(guān)。相同分子量的線狀、開環(huán)和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中的移動速度不一樣，移動速度次...

一、PEI轉(zhuǎn)染試劑的作用PEI轉(zhuǎn)染試劑，全稱聚乙烯亞胺（polyethylenimine），是一種常見的DNA、RNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑。PEI會與DNA形成一種復合物，并將DNA導入人體細胞內(nèi)，使其表達您需要的蛋白質(zhì)。二、PEI轉(zhuǎn)染試劑的原理PEI轉(zhuǎn)染試劑的原理是利用PEI分子所帶上的各種官能團對DNA或RNA質(zhì)粒進行吸附，形成一個復合物，再將該復合物轉(zhuǎn)運至細胞內(nèi)，使DNA或RNA質(zhì)粒得以進入細胞，并在細胞內(nèi)進行表達。而PEI分子帶上的陽離子基團能夠與細胞的負電荷相結(jié)合，從而達到...

高保真DNA聚合酶是一種具有高準確性和高速度的酶，廣泛應用于PCR擴增、突變篩選、基因克隆、DNA測序等領(lǐng)域。其在基因工程和生物技術(shù)研究中有著十分重要的作用。作用原理：高保真DNA聚合酶可將DNA單鏈合成DNA雙鏈，并對DNA進行擴增。該酶的作用機理基于DNA聚合酶基本的催化反應機制：利用DNA單鏈為模板，在DNA聚合酶的作用下，引物與模板互補結(jié)合進行DNA聚合反應。高保真DNA聚合酶的主要特點是：具有一定的3’-5’外切活性，能修正因PCR擴增引入的多種誤差，如插入、缺失、...

DNA聚合酶是細胞復制DNA的重要作用酶，目前為止已發(fā)現(xiàn)有5種DNA聚合酶，分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ，都與DNA鏈的延長有關(guān)。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點：都能以DNA為模板，從5'向3'進行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點：1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶沒有，當需要解開雙鏈的...

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而細胞凍存步驟及細胞凍存液的選擇也是影響細胞凍存效率及解凍復蘇后細胞活力的主要條件。下面就以細胞凍存液為例講解細胞凍存原理及細胞凍存的步驟。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使...

慢病毒是一種有包膜的RNA病毒，直徑為80-120nm，呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細胞的類型)，再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼，最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒感染的顯著特點是感染個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前，大多經(jīng)歷長達數(shù)年的潛伏期，之后緩慢發(fā)病，因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)?？商峁┧械霓D(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所...